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從實驗室到臨床：無血清細胞存凍液的轉化應用之路
2024-08-26 在生物醫學研究和細胞治療領域，細胞的長期保存與復蘇是至關重要的環節。傳統的細胞冷凍保存技術多依賴于含血清的培養基，但血清來源的不確定性及可能引入的污染，限制了其在某些領域的應用。無血清細胞存凍液作為一種新興的細胞保存解決方案，為細胞冷凍保存技術開辟了新的篇章。本文將深入探討無血清細胞存凍液的原理、優勢及其在細胞保存領域的重要性。無血清細胞存凍液是一種專為細胞冷凍保存設計的無血清、無蛋白的保存液。它通常含有細胞保護劑，如二甲基亞砜(DMSO)、乙二醇等，這些成分能夠減少細胞在冷...
李記生物預染蛋白分子量標準（蛋白Marker的分類與選擇）
2024-08-23 蛋白Marker即蛋白分子量標準，是幾種已知分子量的蛋白質的混合物，像“尺子”一樣用來指示蛋白質條帶的大小。在WesternBlot實驗中，蛋白Marker主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，此外，蛋白Marker還可以用來輔助判斷蛋白轉膜是否成功或蛋白在凝膠上的電泳進度等作用，所以選擇合適的蛋白Marker也是實驗成功的重要條件之一。李記生物預染蛋白分子量標準預染蛋白在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量，以上2個圖片為兩種緩沖體系下的電泳示意圖。適合作為SDS-PAG...
無血清細胞凍存液的操作方法
2024-08-21 無血清細胞凍存液的操作方法主要包括細胞的收集、離心、凍存液的加入、分裝、凍存以及后續的解凍與復蘇等步驟。以下是詳細的操作方法：一、細胞的收集與離心細胞收集：使用常規方法收集處于對數生長期的懸浮細胞或貼壁細胞。對于貼壁細胞，可以使用胰酶或EDTA等試劑進行消化，使其從培養瓶或培養板表面脫落，然后收集到試管或離心管中。細胞離心：將收集到的細胞懸浮液置于離心管中，進行離心處理以收集細胞沉淀。離心條件通常為1,0002,000rpm，4℃，持續35分鐘。注意，離心時應確保溫度適宜，以...
蛋白酶K的酶學特性及其在生物醫學研究中的重要性
2024-08-17 蛋白酶K，屬于一種廣譜蛋白酶，由白色念珠菌（Candidaantarctica）發酵產生。它能夠在較寬的pH值范圍內（pH4-12）保持活性，且在高溫條件下（65℃）仍能穩定工作，這種穩定性使蛋白酶K能夠在多種實驗條件下發揮其作用，成為科研人員手中的得力助手。在分子生物學領域，蛋白酶K的應用尤為廣泛。在DNA提取過程中，蛋白酶K能夠高效地降解細胞和組織中的蛋白質，包括那些與DNA緊密結合的組蛋白，從而釋放出純凈的DNA，為后續的PCR擴增、測序等實驗提供高質量的DNA模板。此...
RIPA裂解液介紹與如何選擇
2024-08-15 提到蛋白提取，大家不約而同會想到RIPA裂解液，裂解液加入樣品中，離心即可完成蛋白的提取。然而RIPA裂解液我們真的用對了嗎？RIPA裂解液是從動物細胞或組織中提取蛋白的常用裂解液，其工作原理是利用去污劑（表面活性劑）裂解細胞膜和核膜，從而獲取細胞和組織中的RIPA可溶性蛋白。RIPA裂解液的選擇RIPA裂解液中主要包含去污劑，緩沖體系，等滲體系，變性劑、穩定劑等。其中去污劑是細胞裂解液中重要成分，是由疏水尾端基團和極性親水頭端基團組成的兩性分子，它們能夠降低水的表面張力，所...
bca法測蛋白濃度原理、實驗步驟及注意事項
2024-08-15 蛋白質濃度測定是用于計算純化方法的回收率的重要方法。常用的測定方法包括雙縮脲法、Lowry法、紫外吸收法、BCA蛋白濃度檢測法等。其中常用的方法就是BCA法。BCA全稱是BicinchoninicAcidAssay，也叫SmithAssay，這個方法是由PaulK.Smith發明的。這個方法通過展示不同濃度樣品的顏色變化來判斷蛋白的濃度。檢測原理BCA是一種堿性的水溶性復合物，性質穩定。在其提供的堿性環境下，蛋白質可以將BCA試劑中的Cu2+還原為Cu+，Cu+繼而與BCA試...
DNA電泳套裝：揭開基因的奧秘
2024-08-15 在現代生物技術領域，DNA電泳技術已成為一種實驗手段。它廣泛應用于基因克隆、基因突變檢測、DNA序列分析等領域。而DNA電泳套裝則是進行這項實驗的工具。本文將為您詳細介紹DNA電泳套裝的組成、原理及其在生物科研中的應用。一、DNA電泳套裝的組成DNA電泳套裝主要包括以下幾部分：電泳儀：用于提供穩定的直流電源，使DNA分子在電場作用下發生遷移。電泳槽：一般為矩形或梳子形狀，用于裝載電泳凝膠。電泳凝膠：由聚丙烯酰胺或瓊脂糖等物質制成，是DNA分子遷移的載體。凝膠制備試劑：包括凝膠...
黑膠蟲污染怎么解決（黑膠蟲清除劑）
2024-08-09 黑膠蟲是一種生物還是非生物，學術界至今還有爭議，這里暫且將其認作是一種微生物。黑膠蟲往往來源于血清，是一種常見的細胞污染物，與細胞共生，隨細胞傳代而傳代，通常抗生素對其無效。黑膠蟲與細胞競爭性生長，對細胞生長不利，嚴重時導致細胞死亡。目前很多細胞存在被黑膠蟲污染的現象，對細胞培養及其后續實驗造成了極大地影響。黑膠蟲特征?培養基和正常培養基沒有區別；?低倍鏡下是黑色的點點和細胞碎片沒有區別；?高倍鏡下可以觀察到點狀片狀的游動小體，能模仿細胞碎片和細胞分泌物做布朗運動；?與細胞的...

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